產(chǎn)品與服務(wù)
病毒濃縮液
| 產(chǎn)品貨號(hào) | 規(guī)格 | 價(jià)格 |
| FZ012-03 | 3 mL | 149 元 |
| FZ012-15 | 15 mL | 459 元 |
| FZ012-50 | 25 mL X 2 | 799 元 |
濃縮步驟操作簡便，無需超速離心或過柱純化- 濃縮后病毒滴度可提高5-50倍，回收率可達(dá)60%-70%
- 有效去除雜質(zhì)，降低病毒液額外細(xì)胞毒性
本產(chǎn)品是一種簡單、快速、高效的可以用于多種常見重組病毒濃縮的試劑盒，無需超速離心或過柱，濃縮后病毒滴度可提高 5-50 倍，并能有效去除病毒上清液中含有的大量血清蛋白、細(xì)胞碎片、基因組 DNA 等。
產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)
1. 使用便捷。只需將病毒沉淀試劑(5X)與含病毒的上清液按照 1:4 的比例混合，4 oC 孵育后離心，用自備的 PBS 或基礎(chǔ)培養(yǎng)基重懸病毒沉淀即可。
2. 無需使用超高速離心機(jī)長時(shí)間離心，普通冷凍離心機(jī) 3000-8000 × g 離心 30 min 即可。
3. 病毒濃縮效率高，純化效果好。使用本產(chǎn)品進(jìn)行病毒濃縮后，病毒滴度可提高 5-50 倍，并能有效去除病毒上清液中含有的絕大部分蛋白、細(xì)胞碎片、基因組 DNA 等。儲(chǔ)存及運(yùn)輸條件冰袋運(yùn)輸。試劑置于 4 ℃保存，有效期一年。
使用方法
1. 取收集得到的含病毒的上清液，使用 0.45 μm 針頭濾器(PES)過濾以充分沉淀細(xì)胞碎片。
注：過濾時(shí)，須使用聚醚砜膜(PES)的針頭濾器，其它材質(zhì)如硝酸纖維(NC)膜可能對(duì)病毒有吸附作用。
2. 取過濾后的病毒原液 40 mL，加入 10 mL 4 oC 預(yù)冷的病毒濃縮液（病毒原液的 1/4 體積），充分混勻后放于 4 ℃，每 30 min 混合一次，共進(jìn)行 4~6 次混勻。繼續(xù)于 4 oC 放置 6-18 h。
注 1：病毒沉淀試劑(5X)粘性較大，需緩慢吸取，緩慢加入，并且與病毒上清液充分混勻。
注 2：病毒沉淀過程中須保持 4oC，溫度偏高時(shí)，會(huì)導(dǎo)致沉淀不充分。
注 3：4℃孵育充分后通常溶液會(huì)變渾濁，更長的孵育時(shí)間（如 4℃過夜）有助于提高病毒回收率，如果樣品體積大，如超過 100ml，建議延長孵育時(shí)間，但孵育時(shí)間不宜超過 24h。
3. 孵育結(jié)束后，3000-8000 x g，4℃離心 30 min，此時(shí)離心管底通常可見白色沉淀（有時(shí)沉淀不可見），小心吸棄上清，離心 1~2min，吸走殘余液體。加入原病毒上清液體積的1/10~1/100 的病毒溶解液（PBS 或培養(yǎng)基）（可通過降低病毒溶解液的體積來獲得濃度更大的病毒液），使用移液器小心吹打 20~30 次，重懸病毒沉淀（有時(shí)沉淀不可見，需要在沉淀可能形成的區(qū)域用移液器小心吹打）。根據(jù)后續(xù)需要，適當(dāng)分裝后于-80oC 凍存?zhèn)溆谩?/span>
注 1：避免劇烈吹打，產(chǎn)生氣泡可能導(dǎo)致病毒失活。
注 2：白色沉淀中除病毒顆粒外，還有極少量血清蛋白和基因組 DNA 等
NC-shRNA陰性慢病毒使用E-poly? Fast-Lv包裝試劑盒正向包毒48小時(shí)后收毒，測定病毒上清液出毒滴度為2E8 TU/mL。而后采用慢病毒濃縮液分別進(jìn)行10X和20X濃縮后染毒結(jié)果對(duì)比如下：
某過表達(dá)慢病毒（轉(zhuǎn)移質(zhì)粒大小約10 kb）使用E-poly? Fast-Lv包裝試劑盒正向包毒48小時(shí)后收毒，測定病毒上清液出毒滴度分別為5E6 TU/mL和1E7 TU/mL。而后采用慢病毒濃縮液分別進(jìn)行10X和80X濃縮后染毒結(jié)果對(duì)比如下：
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